Steve McGarrett (Alex O'Loughlin) kommt nach Hawaii, um den Tod seines Vaters zu rächen, aber als der Gouverneur sein eigenes Einsatzkommando anbietet, akzeptiert er. Er sammelt Teammitglieder auf dem Weg: Danny Williams (Scott Caan), der leitende Detektiv im Fall seines Vaters; Chin Ho Kelly (Daniel Dae Kim), ein ehemaliger Detektiv des Honolulu Police Department, der wegen angeblicher Korruption entlassen wurde und McGarretts alter Patrouillenpartner; Kono Kalakaua (Grace Park), eine Kadettin an der Polizeiakademie, die eine Woche vor dem Abschluss steht; Lori Weston (Lauren German), vorübergehendes Mitglied von Five-O; Catharine Rollins (Michelle Borth), eine Freundin von Steve; und Captain Lou Grover (Chi McBride), ehemaliger Leiter der S.W.A.T. der Chicagoer Polizeiabteilung.